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雙抗混合液如何正確使用

更新時間:2025-12-30      點擊次數(shù):282
雙抗混合液(100X)用于預(yù)防細胞培養(yǎng)的細菌污染,特別是革蘭氏陽性和陰性細菌的污染。產(chǎn)品經(jīng)過濾除菌處理,可以直接添加到細胞培養(yǎng)液內(nèi)。青霉的含量為10kU/ml,含量為10mg/ml.在細胞培養(yǎng)液中推薦的青霉的工作濃度為100U/ml,鏈霉的工作濃度為0.1mg/ml。即按照100倍稀釋使用即可。
核心操作要點如下:
一、配制與保存
‌工作濃度‌:按1:100比例稀釋(如5ml雙抗母液+495ml培養(yǎng)基),終濃度青霉素100U/ml、鏈霉素0.1mg/ml。
‌保存條件‌:母液需-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融(≤3次);工作液需2周內(nèi)用完。
二、使用流程
‌實驗前準備‌:徹底清除舊培養(yǎng)基,PBS潤洗后加入預(yù)溫的雙抗培養(yǎng)基。
‌無菌操作‌:在超凈臺內(nèi)完成,使用無菌移液器具,開蓋后優(yōu)先分裝母液。
‌解凍與溶解‌:母液需2-8℃緩慢解凍,若出現(xiàn)結(jié)晶可37℃溫育20-30分鐘或輕輕搖勻,禁止劇烈震蕩。
注意事項:
‌避免污染‌:操作全程需無菌,母液分裝后使用,減少污染風險。
‌濃度控制‌:過高濃度易致細胞毒性,需嚴格按比例稀釋。
‌特殊場景‌:
難抑菌污染:改用含慶大霉素或兩性霉素B的三抗溶液。
無血清培養(yǎng):選擇無動物源成分的合成抑菌劑。
流式細胞術(shù)干擾:選用無酚紅配方的雙抗溶液。

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